Ew di pêvajoyên jiyanê de rolek girîng dilîze, Tyrr, Ser, Thr, ku li ser peptîdê têne fosforîlasyon kirin.Asîda amînî ya fosforîlkirî bi gelemperî di hilberîna peptîdê asîda fosforîk de tê bikar anîn, ku niha di asîdên amînî yên yek phenyl fosforylated de tê bikar anîn.Amîno asîdên HBTU/fosforîlatkirî bi gelemperî têne bikar anîn da ku bi awayê HOBt/DIEA asîdên amînî yên fosforîlekirî ve girêbidin, lê peptîda asîdê fosforîk vê kêmasiyên nêzîkbûnê hildibijêre, nemaze di peptîdên peptîdê yên pir dirêjtir an fosfatê amîno asîdê de têne hilberandin, girêdana karîgeriyê kêm, kêm e. paqijiya hilberê dawîn.Ji bo vê fosphopeptide, me nêzîkatiyek bijartî ya post-phosphorylation fikir kir.Pêvajoya hilberînê rakirina bijartî ya komên parastinê yên zincîra alîgirê amîno asîdê ye ku pêdivî ye ku piştî senteza peptîdê were nîşankirin.Ji bo Tyr, Thr dikare rasterast bi karanîna asîdên amînoyî yên bi zincîreyên aliyên neparastî re bertek nîşan bide.-Ser (trt), ji hêla 1%TFA/DCM-ya hawîrdorê ve bi hejmarî tê rakirin.
Fosforîlasyon, bi fosforamîdê benzen fosfît du qat û çar nîtrojen têne çêkirin û navbeynkarên çalak ên fosforamîd tetrazolium, bi hîdroksiyê ve girêdayî ne, dûv re di bin oksîda peroksîdê acîdê de avakirina fosforîl, reaksiyonek bêkêmasî.
Heya nuha, rêbaza guheztina fosforîkirî ya peptîd du celebên sereke hene:
(1) danasîna rasterast a asîdên amînî yên fosforîlatkirî yên bi nermî yên garantîkirî di rêza polîpeptîdê de;
(2) piştî rezîla ku li ser rêza peptîdê hatî çêkirin, ber bi fosforîlasyona Ser, Tyr, an Thr ya hîdroksîla zincîra alî.
1) dê asîdên amînî yên fosforîlekirî bi nermî garantî bikin ku rasterast rêza peptîdê destnîşan dikin:
Ango, asîdên amînî yên ku hewce ne ku werin fosforîl kirin dê di pêş de bi karanîna (Thr, Ser an Tyr) bêne fosforîl kirin û bi guncan bêne parastin, û dûv re fosforîlasyon dê li ser bingeha pêvajoya hilberîna SPPS-ya normal heya xala hilbijartinê ya nîşana polîpeptîd were teng kirin. .Ev rêbaz hêsan e ku meriv xebitîne, bûye rêbaza sereke ya guheztina fosforîlasyona pargîdaniyên peptîdê.
2) piştî rezîna ku li ser rêzika peptîdê hatî çêkirin, ji bo ser hîdroksî fosforîlasyona Ser, Tyr, an zincîrên alîgir ên Thr:
Xemilandina fosforîlasyonê bi karanîna fosforîlasyona yek girêbestê di rêbaza polîpeptîdê de, ji ber astengiya sterîkî ya ku ji hêla komên mezin ve di xemilandina zincîra alî de hatî çêkirin, dijwar e ku fosforîlasyona asîdên amînî bi zincîra peptîdê re biqelişe.Di pêşerojê de, danasîna asîdên amînoyî dê dijwartir be, nemaze di xemilandina ku gelek deverên fosforîlasyonê pêk tîne, nifş dê pir dijwar bibe, berhevoka hilbera paşîn tevlihev e, ji hev veqetandinê dijwar e, û hilberîn pir kêm e.
Ji ber vê yekê, dema ku gelek cîhên di zincîra peptîdê de fosforîle dibin, meriv dikare hilbijêre ku rêzika peptîdê li ser resin çêbike û dûv re wê ji hêla koma hîdroksîl a zincîra alî ya Ser, Tyr, an Thr ve fosforîle bike: nifşa wê bi giranî bi rakirina hilbijartî ve girêdayî ye. Koma parastî ya zincîra alî ya ku piştî senteza peptîdê nasîna asîdên amînî hewce dike.Ji bo Tyr, Thr dikare rasterast bikar bîne zincîrên alîgirê amînoyî ku di bersivê de nayên parastin.
Bingeha parastina zincîra alî 1% jîngeha TFA/DCM dikare bi hejmarî were rakirin.Dema ku ev rêbaz tê hilbijartin, navbeynkarek çalak a fosforamidît tetrazolium dikare bi karanîna dibenzyl fosforamidit û tetrazolium, bi komek hîdroksîl ve were girêdan, û dûv re were oksîd kirin ku di hawîrdora peroxyacid de komek fosforîl ava bike da ku reaksiyonê temam bike.
Dema şandinê: Sep-08-2023